在肝细胞癌（HCC）中，AKT信号通路的异常激活是肿瘤进展的关键驱动因素，但其上游调控机制尚未完全阐明。2025年发表于《Cell Death and Disease》的研究《Targeting FAM134B-DDX3X axis inhibiting AKT signaling in hepatocellular carcinoma》首次揭示：FAM134B顺利获得直接结合并稳定DDX3X蛋白，激活DDX3X-Rac1-AKT信号轴，促进HCC进展；而DDX3X反过来增强FAM134B的转录，形成正反馈循环。靶向该轴的联合策略（DDX3X抑制剂RK-33 + FAM134B敲低）在体内外均显示协同抗肿瘤效果，为HCC治疗给予了新方向。

Part 1：发现与功能确立——FAM134B与DDX3X的直接互作及其促癌作用

研究顺利获得免疫共沉淀与质谱联用（IP-MS）筛选出DDX3X是FAM134B的关键结合蛋白，并顺利获得外源/内源Co-IP、GST Pull-Down及免疫荧光共定位验证了二者的直接相互作用（图1A-E）。分子对接进一步揭示了FAM134B的Glu354/Asn355与DDX3X的Ser584顺利获得氢键结合（图1F, 表2）。功能上，FAM134B过表达显著提升DDX3X蛋白水平并激活AKT磷酸化，而FAM134B敲低则逆转这一效应（图2A），确立了FAM134B-DDX3X轴在HCC中的促癌基础。

图1（A-E）

Part 2：机制深挖——FAM134B顺利获得泛素化修饰稳定DDX3X蛋白

研究发现FAM134B对DDX3X的调控发生在翻译后水平，不影响其mRNA表达（图2B）。顺利获得环己酰亚胺（CHX）降解实验证实FAM134B延长DDX3X蛋白半衰期（图2C-F），且蛋白酶体抑制剂MG132可恢复FAM134B敲低导致的DDX3X下降（图2G）。进一步泛素化分析显示，FAM134B抑制DDX3X的K48连接多泛素化（降解信号），同时增强K63连接多泛素化（稳定信号），从而阻断其蛋白酶体降解（图2I-J），揭示了FAM134B稳定DDX3X的精确分子机制。

Part 3：功能验证——DDX3X在体内外驱动HCC增殖与转移

研究证实DDX3X在多种HCC细胞系中高表达，其过表达可显著增强AKT信号通路关键位点Ser473的磷酸化水平（图3A）。功能实验表明，DDX3X过表达能强力促进HCC细胞的增殖（顺利获得CCK-8、软琼脂和集落形成实验验证，图3B-F）、迁移与侵袭（顺利获得Transwell实验验证，图3I-K）。相反，敲低DDX3X则会导致细胞周期阻滞在G1/G0期（图3G-H），显著抑制其恶性表型。这些体外发现进一步在动物模型中得到证实：在皮下移植瘤模型中，敲低DDX3X可显著抑制肿瘤的生长（图4A-C）并降低增殖标志物Ki-67的表达（图4D-E）；在尾静脉注射肺转移模型中，DDX3X敲低有效减少了肺部转移结节的数量（图4F-H），从体内外两个层面确立了DDX3X在HCC中的核心致癌作用。

图3（A-K）

图4（A-H）

Part 4：通路解析——阐明FAM134B经由DDX3X-Rac1轴激活AKT信号

为阐明FAM134B如何顺利获得DDX3X精确激活AKT，研究者对下游机制进行了深入探索。他们发现，DDX3X顺利获得促进小G蛋白Rac1的翻译来激活AKT。关键的回复实验证明，在FAM134B过表达的细胞中，同时敲低DDX3X会完全废除其对AKT磷酸化的激活作用以及对细胞增殖、迁移的促进作用（图5A-H）。反之，在FAM134B敲低的细胞中，重新过表达DDX3X则能有效恢复被削弱的AKT信号和致癌能力（图5A-H）。这一依赖关系在体内实验中也得到验证，DDX3X过表达可以部分挽救因FAM134B敲低而受损的肿瘤生长和转移能力（图5I-O）。这些数据有力地证明了FAM134B是依赖于DDX3X-Rac1轴来驱动AKT信号通路和HCC进展的。

图5（A-O）

Part 5：核心突破——揭示DDX3X转录激活FAM134B的正反馈循环

在机制研究过程中，一个意外的发现揭示了更为复杂的调控网络：DDX3X本身能够上调FAM134B的蛋白水平（图5A, 6A）。深入探究发现，DDX3X并不影响FAM134B蛋白的稳定性（图6C-D），而是顺利获得增强其转录来实现这一调控。RT-qPCR和双荧光素酶报告基因实验证实，敲低DDX3X会降低FAM134B的mRNA水平（图6E），而过表达DDX3X则能显著提升FAM134B的启动子活性（图6F-G）。这一机制不依赖于DDX3X的解旋酶功能（图6B）。鉴于DDX3X在HCC组织和细胞中均定位于细胞核与细胞质（图6H），它具备了直接参与转录调控的细胞学基础。至此，一个完整的'FAM134B稳定DDX3X → DDX3X转录上调FAM134B'的正反馈循环被成功揭示，这极大地增强了该信号轴在驱动HCC恶性演进中的稳定性和效力。

图5（A）

图6（A-H）

Part 6：临床意义——DDX3X在HCC中高表达并与FAM134B正相关

研究中的一个关键发现是，FAM134B与DDX3X之间存在一个相互促进的正反馈循环。除了FAM134B能稳定DDX3X蛋白外，研究者发现DDX3X同样能够反向调控FAM134B：敲低DDX3X会显著降低FAM134B的蛋白和mRNA水平（图6A, E），而这种调控不依赖于DDX3X的解旋酶活性（图6B）。顺利获得双荧光素酶报告基因实验，研究直接证实DDX3X可以增强FAM134B的启动子活性（图6F-G），表明DDX3X在转录水平上正向调控FAM134B。这一发现，结合两者在临床HCC样本中的表达呈显著正相关（图7F-G），共同揭示了一个完整的“FAM134B稳定DDX3X → DDX3X转录上调FAM134B”的正反馈放大环路，这为解释该信号轴为何在HCC中持续强力激活给予了关键机制。

Part 7：治疗前景——协同靶向FAM134B-DDX3X轴展现巨大应用潜力

基于FAM134B与DDX3X相互促进的机制，研究者提出了协同靶向这一轴心的治疗新策略。他们发现，DDX3X高表达的HCC细胞系对特异性抑制剂RK-33更为敏感（图8A）。随后，在动物模型中验证了联合疗法的效果：在皮下移植瘤模型和高血压尾静脉注射（HTVI）模型中，单独使用RK-33或单独敲低FAM134B均能抑制肿瘤生长，但将RK-33治疗与FAM134B敲低联合使用时，展现出最强的协同抑瘤效果，表现为肿瘤体积和重量最小（图8D-H）。这一联合策略也最有效地抑制了肿瘤组织内的AKT信号通路活化。该结果充分证明了同时靶向FAM134B-DDX3X正反馈环路在HCC治疗中的巨大应用潜力。

总结与展望

本研究系统揭示了FAM134B-DDX3X正反馈轴顺利获得调控Rac1-AKT信号驱动HCC进展的全新机制，突破了以往对二者独立功能的认知。利用RK-33与FAM134B敲低的协同治疗策略，为HCC给予了具有临床转化潜力的组合方案。该研究不仅深化了对HCC信号网络的理解，也为探索其他癌症中ER-phagy受体与RNA解旋酶的交叉对话给予了新范式。

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原文信息：Mo J, Su C, Liu Q, Li P, Xu L, Long X et al. Targeting FAM134B-DDX3X axis inhibiting AKT signaling in hepatocellular carcinoma. Cell death & disease 2025; 16: 797.