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蛋白邻近标记技术(PL)

分子互作实验服务

邻近标记技术(Proximity labeling, PL)将目的蛋白与生物素连接酶TurboID融合表达,利用生物素连接酶将空间上靠近目的蛋白的猎物蛋白进行生物素化,然后利用生物素对猎物蛋白进行标记,利用链霉亲和素磁珠富集猎物蛋白,并顺利获得质谱方法对富集蛋白进行鉴定。该技术是传统AP-MS的补充和革新,可探索大量潜在未知的瞬时和微弱互作景观。

分子互作实验服务

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技术原理 :

邻近标记技术(Proximity labeling, PL)将目的蛋白与生物素连接酶TurboID融合表达,利用生物素连接酶将空间上靠近目的蛋白的猎物蛋白进行生物素化,然后利用生物素对猎物蛋白进行标记,利用链霉亲和素磁珠富集猎物蛋白,并顺利获得质谱方法对富集蛋白进行鉴定。该技术是传统AP-MS的补充和革新,可探索大量潜在未知的瞬时和微弱互作景观。

技术优势 :

在更加生理的状态下捕获与诱饵蛋白互作的蛋白种类或大分子复合体; 

● 利用生物素-链霉亲和素的非共价结合,允许使用强去垢剂洗涤样品,提高信噪比;

● 适用于低丰度的蛋白或疏水性较强的膜蛋白的互作;  

● 可以捕获瞬时的或较弱的蛋白相互作用;

● 即使瞬时互作的蛋白发生了转移,但由于靶标蛋白仍保留了生物素化的特征,也能顺利获得邻近标 记技术识别检测,不被细胞区室化所影响。

● 适用于分析亚细胞器定位的蛋白质组分,或被用于研究活生物体中的相互作用网络。

原理示意图 :

客户给予 :

① 目的蛋白的具体信息

② 样本:活细胞(T25号瓶大于40%)或冻存细胞(至少两管)

注:样本应在适宜的条件下运输。例如:活细胞样品需常温运输,80℃冻存的组织样品,干冰运输。具体要求请咨询客服。

服务流程 :

服务说明 :

结果交付 :

① 载体构建相关数据及图片(测序和双酶切);

② 生物素标记效率检测;

③ pull down后银染胶图;

④ 质谱的下机数据及个性化的生信分析;

⑤ 原始数据及原始图片;

⑥ 标准的项目结题报告。


案例展示 :

服务保障 :

蛋白邻近标记技术(PL)
邻近标记技术(Proximity labeling, PL)将目的蛋白与生物素连接酶TurboID融合表达,利用生物素连接酶将空间上靠近目的蛋白的猎物蛋白进行生物素化,然后利用生物素对猎物蛋白进行标记,利用链霉亲和素磁珠富集猎物蛋白,并顺利获得质谱方法对富集蛋白进行鉴定。该技术是传统AP-MS的补充和革新,可探索大量潜在未知的瞬时和微弱互作景观。
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