▎技术原理 :
DNA pull-down是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与细胞的核蛋白孵育,纯化出与DNA片段互作的蛋白,洗涤洗脱得到的蛋白产物,做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合;做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如具体某个或某些转录因子/组蛋白/转录激活因子等)。
▎技术优势 :
● 适用范围广:体内/体外均可召开,可广泛适用于真核与原核生物;
● 高特异性:生物素-链霉亲和素为非共价结合,亲和力强,可耐受较强条件的洗涤,从而降低背景;
● 天然性:无需借助外源表达系统,孵育样本为客户研究的本底物种样品;
● 高通量:可结合质谱高通量鉴定,或者定量分析胁迫依赖的动态互作的差异结合蛋白。
▎原理示意图 :
▎客户给予 :
① 启动子序列
② 细胞/原生质体,需10的7次方
③ 植物/动物组织给予1g以上
④ 菌体0.5g以上
注:样本应在适宜的条件下运输。例如:样品需-80℃冻存,干冰运输。
▎服务流程 :
▎服务说明 :
▎结果交付 :
① 剩余实验材料
② 探针电源胶图及标记效率检测Blot图
③ 核蛋白提取及Pull down后蛋白银染结果
④ 质谱下机数据及分析结果
⑤ 个性化生物信息学分析(PPI、蛋白GO/KEGG富集分析)
▎案例展示 :
▎服务保障 :
