▎服务介绍 ：
CRISPR-Cas9是革命性的基因编辑技术，顺利获得向导RNA（sgRNA）将Cas9核酸酶精准靶向到基因组特定位点，实现基因的定向敲除、敲入或定点突变。k8com官网给予从设计到验证的全流程服务，帮助您高效构建基因功能缺失/取得性细胞模型、疾病模型、或进行特定基因位点功能研究，加速您的课题进展。
▎服务内容 ：
k8com官网给予全面且成熟的CRISPR-Cas9编辑方案，涵盖绝大多数研究需求：
① 基因敲除（Knockout, KO）： 顺利获得设计靶向目标基因外显子的sgRNA，介导Cas9切割产生移码突变，从而实现目标基因的永久性功能失活。适用于研究基因功能缺失表型。
② 基因敲入（Knockin, KI）： 在切割目标位点的同时，给予外源供体DNA模板，顺利获得同源重组修复（HDR）机制将报告基因（如GFP）、标签基因（如FLAG、HA）或功能性cDNA等精准插入到基因组特定位点。适用于构建 endogenous tagging 或基因过表达模型。
③ 点突变（Point Mutation）： 顺利获得设计包含特定点突变的供体DNA模板，利用HDR机制将基因组上的特定碱基进行替换，用于模拟人类疾病突变或研究特定氨基酸的功能。
▎技术示意图 ：
▎标准服务流程 ：
k8com官网遵循严谨的流程，确保基因编辑的成功率和可靠性：
① 项目评估与方案设计： k8com官网的专家将根据您的目标（KO/KI/点突变）和基因信息，为您设计并筛选高效、特异的sgRNA序列，优化同源重组臂（对于KI）。
② 载体构建与病毒包装： 将优化的sgRNA、Cas9及供体模板（如需要）克隆至载体中。根据需要为您包装高感染效价的慢病毒或腺相关病毒（AAV），以拓宽细胞感染范围、提高编辑效率。
③ 细胞转染/感染与富集： 将编辑体系顺利获得电转、脂质体转染或病毒感染的方式导入您给予的细胞系中，并顺利获得药物（如Puromycin）进行阳性细胞富集。
④ 单克隆细胞株筛选（Mono-clone Screening）： 将富集后的细胞进行极限稀释，挑选单个细胞克隆并扩大培养。这是取得基因型纯合、性状稳定细胞株的关键步骤。
⑤ 编辑效率验证与功能鉴定：
a）初步筛选： 顺利获得PCR、TA克隆测序或T7E1 assay等方法快速筛选阳性克隆。
b) 深度验证： 对初步筛选出的阳性单克隆进行Sanger测序（针对KO和点突变）或长片段PCR测序（针对KI），在DNA水平确认编辑的正确性。
c）功能验证（可选，请咨询客服）： 给予Western Blot（蛋白水平）或功能性实验（如CCK-8,流式细胞术等）验证编辑效果。
▎样本要求 ：
客户给予：
① 目标细胞的详细信息（名称、种属、培养条件）及目标基因信息（Gene ID, NCBI序列号等）。
② 对于敲入/点突变服务，需给予准确的敲入序列或点突变信息。
③ 目标细胞系（至少2支冻存管，确保备份）。
▎服务说明 ：
服务周期： 基因编辑流程复杂，周期较长，具体取决于编辑类型和细胞难度。
服务报价： 价格因编辑类型、细胞难度、是否需要病毒包装、验证深度等因素而有显著差异。请您给予具体项目需求，k8com官网将为您给予详细的定制化报价方案。
▎结果交付 ：
交付结果： 您将取得：
① 最终产物： 1-3株 经过深度验证的、编辑正确的单克隆细胞株及其培养条件说明（冻存管形式）。
② 完整项目报告： 包括详细的sgRNA序列信息、载体图谱、编辑效率初步检测结果、所有单克隆的测序色谱图及分析结论、Western Blot验证图（如可选）等。
▎k8com官网的优势 ：
1. 专业的设计与优化： 拥有专业的sgRNA设计平台，可有效预测脱靶效应并给予优化方案，最大限度提高编辑效率和特异性。
2. 全面的技术平台： 给予质粒转染、病毒感染等多种递送方式，适应各种难易程度的细胞系。
3. 严谨的验证体系： 坚持顺利获得单克隆筛选和Sanger测序给予基因型纯合的细胞株，确保结果可靠，避免假阴性。
4. 丰富的项目经验： 成功编辑包括HEK293T、多种癌细胞系、干细胞在内的上百种细胞，拥有处理难转染、难生长细胞的经验。
5. 一站式服务： 从设计到验证，k8com官网给予全程服务，您只需给予细胞和基因信息，即可等待接收验证好的单克隆细胞株
▎服务保障 ：
